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產(chǎn)品展示/ Product display

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耐堿性蛋白A瓊脂糖凝膠

耐堿性蛋白A瓊脂糖凝膠
英文名稱:rat-Protein ABerpharoseFF
貨號(hào):B2831
規(guī)格:1ml
本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其它用途!

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-10-29
  • 訪  問  量:624
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詳細(xì)介紹

耐堿性蛋白A瓊脂糖凝膠


英文名稱:rat-Protein ABerpharoseFF


貨號(hào):B2831


規(guī)格:1ml


1.產(chǎn)品介紹


同普通蛋白A瓊脂糖凝膠相比,耐堿蛋白A瓊脂糖凝膠FF大大提高了凝膠的耐堿性,可以使用0.1-0.5MNaOH溶液去除熱源或?qū)δz進(jìn)行清洗。瓊脂糖凝膠骨架上的延伸碳臂和重組耐堿蛋白A上的定向結(jié)合位點(diǎn)的設(shè)計(jì)保證了兩者之間的定向牢固鍵合以及耐堿蛋白A同抗體間的高效親和能力。


2.規(guī)格


1ml(預(yù)裝柱)、5ml(預(yù)裝柱)、10ml(預(yù)裝柱)、25ml、100ml、500ml、1L 純化流程


應(yīng)用舉例:


結(jié)合緩沖液:20mM磷酸緩沖液、150mMNaCl、pH7.0


洗脫緩沖液:0.1M甘-氨酸,PH3.0或0.1M檸檬酸緩沖液,pH 4.0


中和緩沖液:1 M Tris-HCl,pH 8.5


1) 1ml耐堿蛋白A瓊脂糖凝膠FF預(yù)裝柱用5-10個(gè)柱床體積的蒸餾水洗去保存液。


2)用結(jié)合緩沖液平衡5-10個(gè)柱床體積。


3)將5ml人多抗血清用結(jié)合緩沖液稀釋到50ml,0.45μm濾膜過濾上樣。


4)用結(jié)合緩沖液再洗5-10個(gè)柱床體積。


5)用洗脫緩沖液洗脫抗體,收集洗脫峰,并用中和緩沖液調(diào)節(jié)其pH至中性。


6)每次使用后依次使用3個(gè)柱體積的結(jié)合緩沖液,5個(gè)柱體積的去離子水,5個(gè)柱體積的20%的乙醇平衡保存,防止填料被細(xì)菌污染。


7) SDS-PAGE電泳分析。


6.注意事項(xiàng)


1)樣品洗脫后一般pH很低,應(yīng)立刻用堿性中和緩沖液(如1MTris-HCl,pH8.5)將收集到的抗體溶液中和到中性,或在收集容器中事先裝5-10%、pH7.5的緩沖液(如1MTris-HCl或1M磷酸緩沖液),以利于維持抗體的生物活性,避免抗體失活。


2)使用時(shí)保證柱子和緩沖液的溫度一致,避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡,影響純化效果。


3)填料再生清洗:隨著一些變性物質(zhì)的沉淀和蛋白的聚集,往往造成流速和結(jié)合載量下降,嚴(yán)重影響純化效果,這時(shí)需要對(duì)填料進(jìn)行再生清洗(如下步驟):先用3倍柱體積的結(jié)合緩沖液清洗,然后用至少2倍柱體的0.1-0.5 M NaOH清洗,接觸時(shí)間為15 min,最后用5倍柱體積的結(jié)合液沖洗。(注:因0.1–0.5 M NaOH粘度大易造成壓力增加,可進(jìn)行反向沖洗。)


4)本產(chǎn)品保存條件:20%乙醇,4-8℃。


耐堿性蛋白A瓊脂糖凝膠

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