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增加PCR的特異性：1.primersdesign這是zui重要的一步。理想的，只同目的序列兩側(cè)的單一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的一些條件1)足夠長(zhǎng),18-24bp,以保證特異性.當(dāng)然不是說(shuō)越長(zhǎng)越好,太長(zhǎng)的primer同樣會(huì)降低特異性,并且降低產(chǎn)量2)GC%40%~60%3)5'端和中間序列要多GC,以增加穩(wěn)定性4)避免3'端GCrich,zui后3個(gè)BASE不要有GC,或者zui后5個(gè)有3個(gè)不要是GC(有人說(shuō)：3'端是GC/CG/CC/GG。)5)避免3'...

細(xì)胞培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)室里zui常見(jiàn)和zui基本的實(shí)驗(yàn)了，但卻不是zui簡(jiǎn)單的。別小看細(xì)胞培養(yǎng)，這里可蘊(yùn)含著大學(xué)問(wèn)。有時(shí)候細(xì)胞狀態(tài)不好，轉(zhuǎn)染、藥篩這些實(shí)驗(yàn)根本就沒(méi)辦法做。影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素很多，讓我們先從培養(yǎng)基和血清說(shuō)起。經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Invitrogen(GIBCO)、thermofisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用zui廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)...

生物信息學(xué)主要應(yīng)用到HMM隱馬可夫鏈的方法。數(shù)學(xué)中具有馬爾可夫性質(zhì)的離散時(shí)間隨機(jī)過(guò)程。該過(guò)程中，在給定當(dāng)前知識(shí)或信息的情況下，只有當(dāng)前的狀態(tài)用來(lái)預(yù)測(cè)將來(lái)，過(guò)去(即當(dāng)前以前的歷史狀態(tài))對(duì)于預(yù)測(cè)將來(lái)(即當(dāng)前以后的未來(lái)狀態(tài))是無(wú)關(guān)的。在馬爾可夫鏈的每一步，系統(tǒng)根據(jù)概率分布，可以從一個(gè)狀態(tài)變到另一個(gè)狀態(tài),也可以保持當(dāng)前狀態(tài)。狀態(tài)的改變叫做過(guò)渡，與不同的狀態(tài)改變相關(guān)的概率叫做過(guò)渡概率。隨機(jī)漫步就是馬爾可夫鏈的例子。隨機(jī)漫步中每一步的狀態(tài)是在圖形中的點(diǎn)，每一步可以移動(dòng)到任何一個(gè)相鄰的點(diǎn)，...

如今，幾乎每位研究人員都或多或少地知道生成誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSC）的配方。拿出體細(xì)胞，加入四種轉(zhuǎn)錄因子，等待幾個(gè)星期，搞定！不過(guò)，這其中到底發(fā)生了什么，卻是一個(gè)謎，人們想了解卻還未了解。顯然，這涉及到表觀遺傳學(xué)：從成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)變成iPSC，意味著那些過(guò)去關(guān)閉的基因必須再次啟動(dòng)。其他基因，比如細(xì)胞分化的標(biāo)志，則必須調(diào)低。西奈山醫(yī)院Lunenfeld-Tanenbaum研究所的資深科學(xué)家AndrasNagy談道：“每個(gè)細(xì)胞的基因組都幾乎是相同的。表觀基因組哪些基因表達(dá)，哪些蛋白...

血管生成的分期及特征新形成的毛細(xì)血管由內(nèi)皮細(xì)胞和外皮細(xì)胞組民，這兩種細(xì)胞有形成完整的毛細(xì)血管網(wǎng)的能力。在體內(nèi)，伴隨促分化的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，血管生成按內(nèi)皮細(xì)胞激活、增殖、遷徙和管腔形成過(guò)程進(jìn)行。如缺氧等影響腫瘤細(xì)甩的內(nèi)源性或外源性因素促發(fā)細(xì)胞因子的釋放。靜止的內(nèi)皮細(xì)胞受宿主或腫甩釋放的細(xì)胞因子激活(Ⅰ期)，特定的細(xì)胞增殖(Ⅱ期)，并沿血管生成刺激源的纖維網(wǎng)絡(luò)移動(dòng)，形成排列細(xì)胞索(Ⅲ期)，zui后血管芽形成管腔樣結(jié)構(gòu)，細(xì)胞退出細(xì)胞周期后進(jìn)入靜止期。通過(guò)細(xì)胞間起粘附接觸作用的細(xì)胞內(nèi)小泡的...

緩激肽是一種含有9種氨基酸的生理和藥理活性肽，由蛋白質(zhì)的激肽基團(tuán)衍生而來(lái)。激肽是可以促使血管舒張、血管通透性增強(qiáng)、一氧化氮釋放和花生四烯酸流動(dòng)的效應(yīng)因子。它是血壓、腎功能和心臟功能的重要調(diào)節(jié)因子，還參與炎癥反應(yīng)。緩激肽可引起血管擴(kuò)張，從而導(dǎo)致血壓降低。因此，對(duì)這種激素肽的變化進(jìn)行高靈敏度、高選擇性和高準(zhǔn)確度地定量，并將其作為疾病進(jìn)展或藥物治療的評(píng)估指標(biāo)，將會(huì)極為有利。盡管以往都是通過(guò)配體結(jié)合試驗(yàn)(LBAs)對(duì)生物制劑進(jìn)行定量分析，但在過(guò)去幾年中利用LC-MS/MS分析大分子已...

實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)離心管種類有多種。1、按材質(zhì)可分：塑料離心管、玻璃離心管和不銹鋼離心管等。2、按速度可分：低速離心管和高速離心管。3、按容量可分：微量離心管、小容量離心管和大容量離心管。一般稱容量大于100mL的離心管為離心瓶。4、按離心管口部形狀可分：縮口離心管和直口離心管。5、按離心管底部形狀可分：圓底離心管、尖底離心管和平底離心管。6、按離心管與蓋接合形式可分：摁蓋離心管和螺口離心管。7、按用途可分：制備型離心管和分析型離心管。elisa試劑盒,進(jìn)口elisa試劑盒,國(guó)產(chǎn)e...

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、學(xué)習(xí)克隆工作中zui常用的雙酶切；2、學(xué)習(xí)將外源基因與質(zhì)粒連接方法及操作技術(shù)；3、學(xué)習(xí)氯化鈣法制備大腸桿菌(Escherichiacoli)感受態(tài)細(xì)胞的技術(shù)；4、了解細(xì)胞轉(zhuǎn)化的概念及其在分子生物學(xué)研究中的意義。5、外源質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)入受體菌細(xì)胞的技術(shù)以及篩選轉(zhuǎn)化體的技術(shù)。6、學(xué)習(xí)鑒定重組子的方法。二、實(shí)驗(yàn)原理重組子的建立：采用雙酶切質(zhì)粒載體pBR322和pUC18，酶切后產(chǎn)生了互補(bǔ)的粘性末端，在T4DNA連接酶的作用下，兩個(gè)質(zhì)粒片段連接。感受態(tài)細(xì)胞(Compet...

信帆生物分享：ELISA技術(shù)測(cè)定單克隆抗體效價(jià)方法一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.深入了解elisa法測(cè)定抗體效價(jià)的原理。2.掌握ELISA法測(cè)定單克隆抗體效價(jià)的方法。二、實(shí)驗(yàn)原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。免疫酶技術(shù)是將酶標(biāo)記在抗體/抗原分子上，形成酶標(biāo)抗體/酶標(biāo)抗原，稱為酶結(jié)合物。該酶結(jié)合物的酶在免疫反應(yīng)后，作用于底物使之呈色，根據(jù)顏色的有無(wú)和深淺，定位或定量抗原/抗體。ELISA法是免疫酶技術(shù)的一種，...

ELISA實(shí)驗(yàn)代測(cè)：如何正確的進(jìn)行ELISA測(cè)定操作一、研究標(biāo)本的收集和保存用于ELISA測(cè)定的研究標(biāo)本zui為常用的是血清（漿），有時(shí)因?yàn)樘囟ǖ臋z測(cè)目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。目前研究上使用血清標(biāo)本測(cè)定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物等。對(duì)用于激素和治療藥物測(cè)定的血清標(biāo)本的收集，要注意收集時(shí)間甚或體位有可能會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生影響。如可的松在早晨4～6點(diǎn)之間，會(huì)有一峰值出現(xiàn)：生長(zhǎng)激素、促黃體激素（LH）和促卵...