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關(guān)于293/293T細(xì)胞1、種屬都為人，不是鼠。2、來(lái)源：293細(xì)胞是轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞系，293T細(xì)胞由293細(xì)胞派生，同時(shí)表達(dá)SV40大T抗原，含有SV40復(fù)制起始點(diǎn)與啟動(dòng)子區(qū)的質(zhì)粒可以復(fù)制。用Ca3(PO4)2轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)50%。蛋白表達(dá)水平高，轉(zhuǎn)染后2-3天用堿性磷酸酶分析可較容易地檢測(cè)到表達(dá)的蛋白。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞是過(guò)表達(dá)蛋白并獲得細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。3、形態(tài)為上皮細(xì)胞，能致瘤。4、染色體核型：亞三倍體人細(xì)胞系。染色體眾...

一、免疫組化技術(shù)的基本原理應(yīng)用免疫學(xué)及組織化學(xué)原理，對(duì)組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的某些化學(xué)成分進(jìn)行原位的定性、定位或定量研究，這種技術(shù)稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)。*，抗體與抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性，即先將組織或細(xì)胞中的某些化學(xué)物質(zhì)提取出來(lái)，以其作為抗原或半抗原去免疫小鼠等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，制備特異性抗體，再用這種抗體(*抗體)作為抗原去免疫動(dòng)物制備第二抗體，并用某種酶(常用辣根過(guò)氧化物酶)或生物素等處理后再與前述抗原成分結(jié)合，將抗原放大，由于抗體...

實(shí)驗(yàn)原理：PCR擴(kuò)增是模擬天然DNA復(fù)制過(guò)程，利用DNA聚合酶在體外（試管中）擴(kuò)增一對(duì)引物之間特異性DNA片段的方法。其主要熱循環(huán)過(guò)程可分為三個(gè)步驟：（1）高溫變性（denature）：提供DNA復(fù)制的有效模板。（2）低溫退火（anneal）：引物與模板DNA復(fù)性，提供游離3’-OH端供DNA復(fù)制起始；（3）中溫延伸（extend）：依賴Mg2+，DNA聚合酶催化合成與模板互補(bǔ)的新的DNA分子。以上變性、退火、延伸三個(gè)過(guò)程組成一個(gè)循環(huán)周期；常循環(huán)25～40周期，經(jīng)過(guò)n輪循環(huán)后...

如今，幾乎每位研究人員都或多或少地知道生成誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSC）的配方。拿出體細(xì)胞，加入四種轉(zhuǎn)錄因子，等待幾個(gè)星期，搞定！不過(guò)，這其中到底發(fā)生了什么，卻是一個(gè)謎，人們想了解卻還未了解。顯然，這涉及到表觀遺傳學(xué)：從成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)變成iPSC，意味著那些過(guò)去關(guān)閉的基因必須再次啟動(dòng)。其他基因，比如細(xì)胞分化的標(biāo)志，則必須調(diào)低。西奈山醫(yī)院Lunenfeld-Tanenbaum研究所的資深科學(xué)家AndrasNagy談道：“每個(gè)細(xì)胞的基因組都幾乎是相同的。表觀基因組哪些基因表達(dá)，哪些蛋白...

G-protein-coupledreceptors(GPCRs)areactivatedbyawidevarietyofexternalstimuli.UponreceptoractivationtheG-proteinexchangesgdpforGTP,causingthedissociationoftheGTP-boundGalphaａndtheGbetagammasubunits,triggeringdiversesignalingcascades.Receptor...

雙PAG免疫金銀染色原理(一)染色流程：(1)石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×3min.(2)0.1%胰蛋白酶37℃消化20min,或抗原修復(fù)20min(98℃)，自然冷卻至室溫。(3)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×3min.(4)1%EA(卵蛋白)15min,不洗。(5)適當(dāng)稀釋的特異抗體室溫4h或4℃孵育20h,或37C孵育30min.(6)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×5min.(7)0.02mol/L(pH...

抗體藥物作為生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)力，能安全有效地對(duì)癌癥、自身免疫病和感染性疾病等進(jìn)行靶向治療，該藥物在2012年創(chuàng)下645.7億美元的銷售額，占生物制藥51.8%的份額。目前抗體藥物的市場(chǎng)需求量仍在攀升，預(yù)計(jì)到2015年，抗體藥物銷售額有望達(dá)980億美元左右。業(yè)內(nèi)人士認(rèn)為，隨著疾病譜變化，抗體藥物的黃金時(shí)代已經(jīng)來(lái)到。單抗藥物的作用靶點(diǎn)很重要的一部分是行使細(xì)胞功能*的跨膜蛋白，包括多通道膜蛋白MMP(如g蛋白偶聯(lián)受體)和離子通道，這些蛋白也是診斷檢測(cè)的重要分析靶點(diǎn)。目前跨膜蛋...

一、目的通過(guò)氨基酸的分離，學(xué)習(xí)紙層析法的基本原理及操作方法。二、原理紙層析法是用濾紙作為惰性支持物的分配層析法。層析溶劑由有機(jī)溶劑和水組成。物質(zhì)被分離后在紙層析圖譜上的位置是用Rf值(比移)來(lái)表示的：R=原點(diǎn)到層析點(diǎn)中心的距離原點(diǎn)到溶劑前沿的距離在一定的條件下某種物質(zhì)的Rf值是常數(shù)。Rf值的大小與物質(zhì)的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、溶劑系統(tǒng)、層析濾紙的質(zhì)量和層析溫度等因素有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)利用紙層析法分離氨基酸。三、器材1、層析缸①2、毛細(xì)管3、噴霧器4、培養(yǎng)皿5、層析濾紙(新華一號(hào))四、試劑1、擴(kuò)...

T細(xì)胞受體(Tcellreceptor，TCR)是T細(xì)胞表面特異性識(shí)別抗原和介導(dǎo)免疫應(yīng)答的分子，是人類基因組中多態(tài)性zui高的區(qū)域之一，決定著人的免疫系統(tǒng)如何適應(yīng)環(huán)境的變化。T細(xì)胞受體庫(kù)的多樣性(包括基因重組以及選擇性表達(dá))直接反映了機(jī)體免疫應(yīng)答的狀態(tài)。TCR可分為TCRα/β和TCRγ/δ兩種類型,外周血T細(xì)胞主要為TCRα/β的T細(xì)胞,是介導(dǎo)機(jī)體特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)的主要細(xì)胞。如圖1所示：TCRβ基因由可變區(qū)(V)、多變區(qū)(D)、結(jié)合區(qū)(J)和恒定區(qū)(C)四部分基因片段組成...

實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)離心管種類有多種。1、按材質(zhì)可分：塑料離心管、玻璃離心管和不銹鋼離心管等。2、按速度可分：低速離心管和高速離心管。3、按容量可分：微量離心管、小容量離心管和大容量離心管。一般稱容量大于100mL的離心管為離心瓶。4、按離心管口部形狀可分：縮口離心管和直口離心管。5、按離心管底部形狀可分：圓底離心管、尖底離心管和平底離心管。6、按離心管與蓋接合形式可分：摁蓋離心管和螺口離心管。7、按用途可分：制備型離心管和分析型離心管。elisa試劑盒,進(jìn)口elisa試劑盒,國(guó)產(chǎn)e...